叶绿素含量测定

常用叶绿素提取试剂：丙酮、乙醇、N，N-二甲基甲酰胺(DMF) 提取方法：研磨、浸泡 丙酮法测定叶绿素含量 乙醇:丙酮:H2O = 4.5:4.5:1 (体积比) 提取方法对比： 常规方法是研磨提取 改进方法是浸泡提取 提取注意事项： 1. 整个过程尽量避光操作 2. 称量样品要快速准确0.1g 3. 每个样品三个技术重复，每个实验三个生物学重复。 实验步骤： 1.配置buffer提取液，乙醇：丙酮：水=4.5:4.5:1或80%丙酮 2.取2.0ml的离心管，加入准确称量后剪碎的样品，加入2.0mlbuffer. 3. 封口膜封口，4℃过夜（12h） 避光保存。待叶片变白色后。即完成抽提。若提取液体浑浊，可短暂离心后，再测吸光度。 4. 使用buffer作为空白对照，测量吸光度。A663 A645

叶绿素a = (12.72A663-2.59A645) × v/w × 1,000 叶绿素b = (22.88A645-4.67A663) × v/w × 1,000 叶绿素总含量 = (20.29A645+8.05A663) × v/w × 1,000